分光光度计在更换、重新安装、运输或检修光源灯后，以及当机器不能正常工作时，都应进行波长校准。对于正常运行的机器，还应每月检测一次波长，必要时进行校准，以确保波长读数与通过样品的波长一致，并确保机器的第一灵敏度。通常使用光谱钕滤光片校准方法，适用于721型仪器可见光区域的波长校准。通常以585nm或529nm或T%处的吸收峰为标准。由于721型机器的出射光波长较宽，因此不容易分离573nm和585nm处的两个峰值或波谷，校准过程中可能会出现误差。因此，建议使用529nm处的峰或谷作为波长校准的标准。

分光光度计波长校准方法

校准期间，机器根据需要预热。要求电源电压稳定。波长被卷绕在580nm，T%被调节到顶部。在反应杯处放置一条白纸，检查边缘是否有光强均匀且无光晕或杂散光的斑点。如果不符合要求，调整灯泡位置使其符合要求，这是对波长校准的粗略调整。然后将灵敏度调整至1（最低档位），将波长刻度盘对准529nm，并将仪器的机械零点调零。

当光路为空白时，将T%调整为100%T，并重复检查零点和100%T稳定性信息。将光谱Nd滤光器插入光路中，逐渐旋转波长盘以找到透光率最低的一个（当微旋转波长盘向左和向右旋转时，透光率值增加），即波长为529nm。确定波长盘的指示值是否为529nm。如果指示值为534nm，则波长误差为5nm。

如果超过规定值（±1nm），则必须进行调整。调整方法：将波长盘对准529nm，从光路中取出光谱钕滤光片，当光路为空白时，将仪器指针调整至100%T，然后将光谱钕滤光片插入光路。打开机器左侧的小盖板，找到波长校准螺钉（左手柄长度的螺钉）；沿逆时针方向进行微调（如果存在负误差，则为顺时针方向），使仪表指针的指示器T%最低。重复测量波长误差信息，直到其符合机器的技术规范。装上左侧的小盖板，校准完成。